摘要：本文提出了用高效液相色譜儀分離和測定小麥粉中過氧化苯甲酰的新方法：用甲醇提取面粉中的過氧化苯甲酰，用硫代硫酸鈉還原為苯甲酸，然后用高效液相色譜儀進(jìn)行測定。該方法具有良好的準(zhǔn)確度和再現(xiàn)性。
　　關(guān)鍵詞：高效液相色譜，測定 方法
　　過氧化苯甲酰是一種小麥粉增白劑，它可使面粉中由小麥胚乳產(chǎn)生的黃色胡蘿卜素迅速完全地與之反應(yīng)，使面粉增白。但由于它的還原產(chǎn)物苯甲酸能破壞面粉中的有些營養(yǎng)成分，而且人體攝人過多也不利于健康，所以國標(biāo)GB2760規(guī)定其最大使用限量不得超過0.06g/kg。目前，我國法定的測定方法是氣相色譜法，該方法前處理過程復(fù)雜，容易造成樣品中測定成分損失，影響測定的準(zhǔn)確性。本文用甲醇提取小麥粉中的過氧化苯甲酰，再用硫代硫酸鈉還原為苯甲酸，采用高效液相色譜法進(jìn)行分離和測定，具有良好的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，用于實(shí)際樣品的測定，結(jié)果可靠。
　　1. 測定方法
　　1.1原理：小麥粉中的過氧化苯甲酰用甲醇提取后，用硫代硫酸鈉還原生成苯甲酸，過濾后用高效液相色譜法儀測定，得到色譜圖。以保留時(shí)間定性，以外標(biāo)法定量。
　　1.2試劑：甲醇（色譜純，天津四友）、醋酸銨（分析純）、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品（國家標(biāo)物中心）、硫代硫酸鈉（分析純），實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。
　　1.3儀器：北京創(chuàng)新通恒科技有限公司的高效液相色譜系統(tǒng)（包括P3000型高壓輸液系統(tǒng)、UV3000紫外/可見分光檢測器、色譜數(shù)據(jù)工作站、柱溫箱）
　　1.4色譜條件：
　　色譜柱：C18柱（4.6mm×250mm）
　　流動(dòng)相：甲醇：乙酸銨（0.2%）（5+95）
　　流速：1.0mL/min
　　檢測波長：230nm
　　進(jìn)樣量：20µL
　　1.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：外標(biāo)法定量，苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液采用與樣品相同方法處理后進(jìn)樣，繪制工作曲線
　　1.6樣品處理與測定
　　準(zhǔn)確稱取1.000~1.500g樣品于10mL具塞試管中，加入5.00mL甲醇，混勻后靜置5min。加入1.00mL10%硫代硫酸鈉溶液，混勻，靜置5min，使其充分反應(yīng)，加4.00mL水，使總體積為10.0mL，混勻，靜置。取上層清液，用0.45µm微孔濾膜過濾，作為試液供進(jìn)樣用。
　　1.7結(jié)果計(jì)算：
　　X=×0.992
　　式中：X——樣品中過氧化苯甲酰的含量，g/kg；
　　A——進(jìn)樣體積中苯甲酸的含量，mg；
　　V——樣品稀釋液總體積，mL；
　　V1——進(jìn)樣體積，mL；
　　m——樣品質(zhì)量，g；
　　0.992——由苯甲酸換算為過氧化苯甲酰的換算系數(shù)。
　　2.結(jié)果與討論：
　　2.1經(jīng)過計(jì)算分析，色譜峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)為0.9996，最低檢出限為0.01µg。
　　2.2回收率測定
　　按照以上方法對(duì)六組小麥粉進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，見表1
　　表1

　　由表1可知，平均回收率為96.5%（n=5），說明用本方法測定過氧化苯甲酰的準(zhǔn)確度較高，能夠滿足試驗(yàn)要求。
　　2.3精密度
　　按照該方法對(duì)同一樣品進(jìn)行6次平行測定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.1%，見表1
　　表2

　　2.4樣品測定實(shí)用：
　　采用本法，對(duì)9份實(shí)際樣品進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)4份樣品中過氧化苯甲酰含量超過國家規(guī)定指標(biāo)，測定結(jié)果見表3。由此可見，加強(qiáng)對(duì)小麥粉中增白劑的加添量的控制是非常必要的。
　　表3

　　3.結(jié)論：
　　本法采用甲醇提取過氧化苯甲酰，用硫代硫酸鈉還原為苯甲酸，過濾后用高效液相色譜儀測定，得到色譜圖。以保留時(shí)間定性，以峰面積定量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，本方法樣品處理方式簡單，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度較高，適用于小麥粉中過氧化苯甲酰的檢測。